Модифікація фосфорилювання

 

Дослідження фосфорильованих білків і пептидів може допомогти людям з’ясувати механізм вищезазначеного процесу та глибше зрозуміти природу життєдіяльності. Останніми роками з безперервним розвитком технології протеоміки дослідження фосфорилювання білків отримує все більш широку увагу. Багато природних токсинів і патогенів також проявляють свою дію, змінюючи статус фосфорилювання внутрішньоклітинних білків.

Фосфорильовані поліпептиди в основному відносяться до Ser, Tyr і Thr. Гідроксильна група бічного ланцюга залишку модифікована в кислий фосфатний поліпептид. Поки що модифікація поліпептидів фосфорилювання в основному включає метод пост-фосфорилювання та два методи синтезу:

1727319984199516

При модифікації мономерним методом фосфорильовану амінокислоту важко конденсувати з пептидним ланцюгом через стеричну перешкоду, спричинену більшою групою модифікації бічного ланцюга, і подальше введення амінокислоти буде більш складним. Особливо, коли він містить численні модифікації сайту фосфорилювання, синтез стане надзвичайно складним, а кінцевий продукт містить складні компоненти, його важко розділити та має надзвичайно низький вихід. Отже, коли фосфорилюється декілька сайтів у пептидному ланцюзі, можна розглянути метод пост-фосфорилювання. Основний процес синтезу полягає у вибірковому видаленні захисних груп бічних ланцюгів амінокислот, які потрібно позначити, після завершення синтезу поліпептиду. Для Tyr, Thr амінокислоти з незахищеними бічними ланцюгами можна використовувати безпосередньо для реакції. Захисна група бічного ланцюга при 1% TFA/DCM Її можна кількісно видалити за певних умов. Під час пост-фосфорилювання можна використовувати бісбензилфосфорамідит. Тетразол утворює активний проміжний продукт фосфорамідиту тетразолу, який з’єднується з гідроксильною групою, а потім окислюється в умовах пероксикислоти з утворенням фосфорильної групи для завершення реакції.

 

  • Ми надаємо послуги з модифікації фосфорилювання pSer, pTyr, pThr і D-pSer, D-pTyr, D-pThr.
  • Модифікації фосфорилювання 2 сайтів, 3 сайтів, 4 сайтів і 5 сайтів можуть виконуватися одночасно.

1727319984950142

​​​​​​​

Фосфорильовані пептиди Синтетичний випадок (Thr(HPO3), Tyr(HPO3), Ser(HPO3) очікування)
1. У послідовності є 4 сайти фосфорилювання (xxxpSpTxxxpSxxxpTx), чистота становить 95%, а цикл завершення становить 3 тижні.

ВЕРХ аналіз

1727319984119384

MS Atlas

1727319984199516